技術(shù)原理
CRISPR/Cas9(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是最新出現(xiàn)的一種由sgRNA指導(dǎo)Cas核酸酶對(duì)靶向基因進(jìn)行特定DNA修飾的技術(shù)。在這一系統(tǒng)中,sgRNA引導(dǎo)序列靶定位點(diǎn)剪切雙鏈DNA達(dá)到對(duì)基因組DNA 進(jìn)行修飾的目的。CRISPR/Cas9系統(tǒng)能夠?qū)π∈蠡蚪M特定基因位點(diǎn)進(jìn)行精確編輯,目前瑞思元已經(jīng)成功將此技術(shù)應(yīng)用于小鼠基因敲除/敲入模型制備,以及條件性敲除(Loxp系統(tǒng))模型制備。
目前瑞思元采取優(yōu)化過的野生型Cas9和雙切口Cas9n(Optimized Cas9 System,OCAS and OCASn)。采用優(yōu)化過的雙切口Cas9n(OCASn)可以將脫靶效應(yīng)降到最低。